1、DMSO对细胞存在一定的毒性，用量受到限制，降低或者不使用DMSO，寻找其它替代物是最好的选择。但是目前，该技术领域还未发现冻存保护效果能与DMSO媲美的物质，因此，联合其它成分，形成新的配方，降低DMSO的含量就成了较为现实的选择。
2、血清，即使是纯化得到的白蛋白，由于其动物来源的特性，会极大增加带来病毒等感染物质的可能。而且，血清来源受限，价格昂贵，所以其使用也必然会受到越来越多的限制。因此，寻找替代血清的非渗透性保护剂也显得尤为必要。
3、目前，最成熟和最稳定的冻存细胞技术是将加有保护剂的细胞悬液置于-196℃液氮中，这样可以使细胞暂时脱离生长状态而保持细胞的特性，在需要的时候经过复苏程序，使得细胞重新生长增殖以用于实验。细胞储存在-196℃液氮中，理论上储存时间是无限的，但是液氮冻存步骤繁琐，需要经过程序降温，如先将冷冻管置于4℃冰箱10分钟，然后移至-20℃冰箱30分钟，再移至-80℃冰箱保存16-18个小时（或隔夜），最后才移至液氮罐中进行长期的储存。（其中需要注意的是-20℃条件下不可超过1个小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量的死亡。）
1. 高安全性，不含血清及动物源成分，病毒、霉菌和支原体等污染可能性低，各批产品之间有更高的产品质量一致性。
2. 低DMSO，DMSO的含量为5%（v/v），极大降低了对细胞潜在的毒性作用。
3. 细胞存活率高，无批次差异。
4. 完全冻存液配方，可直接使用，方便简捷。
5. 可直接存放于-80℃冰箱冻存，无需经过费时的程序降温过程（省时、省力、省钱），不需要采用程序降温仪，更不需要放置在-196℃液氮。
6. 可原位冻存，比如杂交瘤细胞的亚克隆，可以大规模减少工作量，避免污染。
冻存效果对比：
图1. 小鼠成纤维细胞3T3细胞复苏后细胞状态对比图
对照B：存活率89% 本产品：存活率97%
图2. 人胚肾细胞293E细胞复苏后细胞状态对比图
对照B：存活率86% 本产品：存活率93%
注：对照A: DMEM培养基+10%血清+10%DMSO，液氮冻存；
对照B: Cellregen无血清细胞冻存液（DMSO 10% v/v）；
本 品：无血清低DMSO细胞冻存液（DMSO 5% v/v）。
附： 通用细胞冻存液，Cellregen无血清细胞冻存液、无血清低DMSO细胞冻存液的比较
|
|
通用细胞冻存液 |
Cellregen 无血清细胞冻存液 |
无血清低 DMSO 细胞冻存液 |
|
主要成份 |
含血清、含 DMSO |
不含血清，含 DMSO 10% |
不含血清，低 DMSO 5% |
|
细胞毒性 |
高 |
高 |
低 |
|
安全性 |
低 动物来源病毒、霉菌和支原体等污染的风险偏高 |
高 无动物来源病毒、霉菌和支原体等污染的风险 |
高 无动物来源病毒、霉菌和支原体等污染的风险 |
|
冻存细胞种类 |
适合含血清细胞冻存 |
通用型 适合各类细胞冻存 |
通用型 适合各类细胞冻存 |
|
无血清培养细胞生长状态 |
易改变易由悬浮状态回复贴壁状态 |
保持悬浮培养状态 |
保持悬浮培养状态 |
|
批次差异 |
批次差异大 |
无批次差异 |
无批次差异 |
|
操作方法 |
步骤繁琐 需程序降温冻存 |
简单快捷 一步冻存 -80 ℃冰箱 |
简单快捷 一步冻存 -80 ℃冰箱 |
|
保存设备 |
要求高（液氮） |
要求低（ -80℃ 冰箱） |
要求低（ -80℃ 冰箱） |
|
微量冻存 |
细胞易死亡，存活率偏低 |
细胞存活率高 |
细胞存活率高 |
|
原位冻存 |
不可行 |
可行，且方便快捷 如 : 杂交瘤细胞孔板冻存 |
可行，且方便快捷 如 : 杂交瘤细胞孔板冻存 |
